基因工程的基本操作程序
高三生物·基因工程·难度 5/5·约 60 分钟
基因工程的基本操作程序包括四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建（核心）、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 一、目的基因的筛选与获取 方法 | 说明 | ---|---| 从相关的已知结构和功能清晰的基因中筛选 | 如 Bt 抗虫蛋白基因 | 利用 PCR 获取和扩增 | 最常用 | 人工合成 | 基因较小且序列已知 | 构建基因文库获取 | — | PCR（聚合酶链式反应）： 项目 | 内容 | ---|--…
学完你应该能
- 说出目的基因获取的方法并阐明 PCR 的原理、条件和过程
- 阐明基因表达载体的组成及构建的目的
- 区分启动子、终止子与起始密码子、终止密码子
- 说明将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法
- 说明目的基因检测与鉴定的层次和方法
常见易错点
认为获取目的基因是基因工程的核心步骤「最高频错误」：核心步骤是基因表达载体的构建。 认为 PCR 需要解旋酶：PCR 通过 90 ℃ 以上高温使 DNA 双链解开。 混淆启动子与起始密码子：启动子位于 DNA 上，是 RNA 聚合酶结合位点；起始密码子位于 mRNA 上。 只检测 mRNA 就认为目的基因成功表达：还需用抗原—抗体杂交检测蛋白质，并进行个体水平鉴定。 用单一限制酶切割导致自身环化：常用两种不同限制酶以防止自身环化和反向连接。
建议先学
这些知识点是学懂《基因工程的基本操作程序》的基础。
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