重组DNA技术的基本工具
高三生物·基因工程·难度 5/5·约 50 分钟
重组 DNA 技术的基本工具包括:「分子手术刀」限制性内切核酸酶、「分子缝合针」DNA 连接酶和「分子运输车」载体。 一、限制性内切核酸酶(限制酶) 项目 | 内容 | ---|---| 来源 | 主要从原核生物中分离纯化 | 作用 | 识别双链 DNA 分子的特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开 | 识别序列 | 大多数由 6 个核苷酸组成,
学完你应该能
- 说明限制酶的来源、作用特点和切割结果
- 比较 E. coli DNA 连接酶与 T4 DNA 连接酶
- 区分 DNA 连接酶与 DNA 聚合酶
- 说出常用载体种类及载体应具备的条件
- 解释标记基因的作用
常见易错点
认为限制酶切断的是氢键「最高频错误」:限制酶使特定部位的磷酸二酯键断开。 认为 E. coli DNA 连接酶能连接平末端:它只能连接黏性末端,T4 DNA 连接酶两种末端都能连接。 混淆 DNA 连接酶与 DNA 聚合酶:连接酶连接两个 DNA 片段且不需模板,聚合酶将单个核苷酸加到链上且需要模板。 把质粒当作细胞器:质粒是独立于拟核或细胞核之外的环状双链 DNA 分子。 目的基因插入破坏了需要用于筛选的标记基因:这样就无法用该标记基因进行筛选。
建议先学
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